Electroforesis: que es, para que sirve y como se hace

Contenido

• Para que sirve
• Como esta hecho
• Tipos de electroforesis
• 1. Electroforesis de hemoglobina
• 2. Electroforesis de proteínas

La electroforesis es una técnica de laboratorio que se realiza con el objetivo de separar moléculas según su tamaño y carga eléctrica para poder realizar el diagnóstico de enfermedades, verificar la expresión de proteínas o identificar microorganismos.

La electroforesis es un procedimiento simple y de bajo costo, que se utiliza en la rutina del laboratorio y en proyectos de investigación. Según el propósito de la electroforesis, puede ser necesario realizar otras pruebas y exámenes para llegar a un diagnóstico, por ejemplo.

Para que sirve

La electroforesis se puede realizar con diferentes fines, tanto en proyectos de investigación como en diagnóstico, ya que es una técnica sencilla y de bajo coste.Por tanto, la electroforesis se puede realizar para:

• Identificar virus, hongos, bacterias y parásitos, siendo esta aplicación más común en proyectos de investigación;
• Prueba de paternidad;
• Verifique la expresión de proteínas;
• Identificar mutaciones, siendo útil en el diagnóstico de leucemia, por ejemplo;
• Analizar los tipos de hemoglobina circulante, siendo útil en el diagnóstico de anemia falciforme;
• Evalúe la cantidad de proteínas presentes en la sangre.

Según el propósito de la electroforesis, puede ser necesario realizar otras pruebas complementarias para que el médico complete el diagnóstico.

Como esta hecho

Para realizar la electroforesis se requiere el gel, que puede ser poliacrilamida o agarosa según el propósito, tampón y tina de electroforesis, marcador de peso molecular y un tinte fluorescente, además de un equipo de luz UV o LED, también conocido como transiluminador.

Después de preparar el gel, se debe colocar un objeto específico para que los pocillos se hagan en el gel, popularmente llamado peine, y dejar que el gel se asiente. Cuando el gel esté listo, simplemente aplique las sustancias en los pocillos. Para ello se debe colocar un marcador de peso molecular en uno de los pocillos, un control positivo, que es la sustancia que se sabe qué es, un control negativo, que garantiza la validez de la reacción, y las muestras a analizar. Todas las muestras deben mezclarse con un tinte fluorescente, ya que de esta manera es posible visualizar las bandas en el transiluminador.

El gel con las muestras se debe colocar en la tina de electroforesis, que contiene la solución tampón específica, y luego se enciende el dispositivo para que exista corriente eléctrica y, en consecuencia, diferencia de potencial, que es importante para las partículas de separación según su carga y tamaño. El tiempo de funcionamiento de la electroforesis varía según el objetivo del procedimiento y puede durar hasta 1 hora.

Después del tiempo especificado, es posible ver el resultado del ciclo electroforético a través del transiluminador. Cuando el gel se coloca bajo luz UV o LED, es posible visualizar el patrón de bandas: cuanto más grande es la molécula, menor es su migración, acercándose al pozo, mientras que cuanto más ligera es la molécula, mayor es el potencial migratorio.

Para que la reacción sea validada, se deben visualizar las bandas del control positivo y no se debe visualizar nada en el control negativo, ya que de lo contrario es un indicio de que hubo contaminación, y se debe repetir todo el proceso.

Tipos de electroforesis

La electroforesis se puede realizar para diferentes fines y, según su finalidad, se pueden utilizar varios tipos de gel, siendo los más habituales la poliacrilamida y la agarosa.

La electroforesis para identificar microorganismos es más común que se realice en laboratorios de investigación, sin embargo, con fines diagnósticos, la electroforesis se puede utilizar para identificar enfermedades hematológicas y enfermedades que evolucionan con el aumento en la cantidad de proteínas, siendo los principales tipos de electroforesis:

1. Electroforesis de hemoglobina

La electroforesis de hemoglobina es una técnica de laboratorio que se realiza para identificar los diferentes tipos de hemoglobina que circulan en la sangre, lo que permite identificar la presencia de enfermedades relacionadas con la síntesis de hemoglobina. El tipo de hemoglobina se identifica mediante electroforesis a un pH específico, idealmente entre 8,0 y 9,0, con un patrón de bandas que se puede comparar con el patrón normal, permitiendo la identificación de hemoglobinas anormales.

Para qué está hecho: La electroforesis de hemoglobina se realiza para investigar y diagnosticar enfermedades relacionadas con la síntesis de hemoglobina, como la anemia de células falciformes y la enfermedad de la hemoglobina C, además de ser útil para diferenciar la talasemia. Aprenda a interpretar la electroforesis de hemoglobina.

2. Electroforesis de proteínas

La electroforesis de proteínas es un examen solicitado por el médico para evaluar la cantidad de proteínas que circulan en la sangre y, así, identificar enfermedades. Este examen se realiza a partir de una muestra de sangre, que se centrifuga para obtener el plasma, la parte de la sangre que consta, entre otras sustancias, de proteínas.

Tras la electroforesis se puede visualizar un patrón de bandas y, posteriormente, una gráfica en la que se indica la cantidad de cada fracción de proteínas, siendo fundamental para el diagnóstico.

Para qué está hecho: La electroforesis de proteínas permite al médico investigar la aparición de mieloma múltiple, deshidratación, cirrosis, inflamación, enfermedad hepática, pancreatitis, lupus e hipertensión según el patrón de bandas y el gráfico presentado en el informe del examen.

Comprender cómo se hace y cómo comprender el resultado de la electroforesis de proteínas.